ELISA法多年來(lái)廣泛應(yīng)用于血站和醫(yī)院的實(shí)驗(yàn)室中，相對(duì)于其它檢測(cè)方法，ELISA法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的特點(diǎn)，并具有操作簡(jiǎn)便、無(wú)放射性危害的優(yōu)點(diǎn)，但是在一些測(cè)定實(shí)驗(yàn)中，結(jié)果會(huì)出現(xiàn)誤差影響測(cè)定結(jié)果。這篇文章總結(jié)了很多的實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)從幾個(gè)方面分析影響結(jié)果的因素。
1 ELISA試劑盒
（1）抗原、抗體活性對(duì)效價(jià)的影響：主要是試劑中抗體（或抗原）的效價(jià)降低或失活，結(jié)果不易判斷。再有ELISA法靈敏度高，對(duì)雜質(zhì)的反應(yīng)靈敏度也高，實(shí)驗(yàn)中空白對(duì)照OD值偏高或假陽(yáng)性。
（2）酶結(jié)合物濃度過(guò)高，也會(huì)導(dǎo)致OD值假性增高。
2 試驗(yàn)儀器
（1）加樣器是否經(jīng)過(guò)校正，酶免測(cè)定血清用血量很少，如手工加樣器的性能不好，吸取樣品不，會(huì)使結(jié)果忽高忽低。
（2）每次洗板前，應(yīng)檢查洗板機(jī)針孔有無(wú)堵塞。
3 實(shí)驗(yàn)操作
（1）檢測(cè)前先將ELISA試劑盒從冰箱取出置室溫平衡20min后使用，試劑用完及時(shí)放回冰箱冷藏，以免造成試驗(yàn)結(jié)果假性降低。
（2）加樣時(shí)注意勿觸及包被板底部，以免擦傷包被物使抗體（抗原）脫落而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
（3）洗滌不充分，會(huì)使結(jié)果假性增高，過(guò)分洗滌呈假陰性。
（4）比色時(shí)應(yīng)保持包被孔底部無(wú)異物、無(wú)水汽，特別是冬季板從37℃水浴箱取出時(shí)，底部留有水汽，應(yīng)將板底擦干后進(jìn)行比色，水汽或孔內(nèi)氣泡也會(huì)使OD值升高。
（5）抗原與抗體反應(yīng)達(dá)到*平衡，依賴(lài)于溫度與時(shí)間。溫度高于45℃易引起失活及標(biāo)記物脫落，溫度低于4℃，影響反應(yīng)速度。
ELISA實(shí)驗(yàn)的影響因素較多，這就更為嚴(yán)格的要求我們?cè)趯?shí)驗(yàn)過(guò)程當(dāng)中要遵守操作規(guī)范，做到細(xì)致嚴(yán)謹(jǐn)，zui大限度或是杜絕各種因素的影響，從而得到準(zhǔn)確無(wú)誤的測(cè)定結(jié)果，更好的服務(wù)于我們的科研工作。
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